Biofizyka : wybrane zagadnienia wraz z ćwiczeniami
Odpowiedzialność: | red. nauk. Zofia Jóżwiak, Grzegorz Bartosz ; aut. Grzegorz Bartosz [at al.]. |
Hasła: | Biofizyka Podręczniki akademickie |
Adres wydawniczy: | Warszawa : Wydawnictwo Naukowe PWN, 2008. |
Wydanie: | Wyd. 1, 2 dodr. |
Opis fizyczny: | 555, [1] s. ; il. ; 24 cm. |
Uwagi: | Bibliogr. przy rozdz. Indeks. |
Przeznaczenie: | Podręcznik dla studentów: biologii, biotechnologii, ochrony środowiska wszystkich typów uczelni, akademii medycznych oraz dla doktorantów i początkujących pracowników naukowych kierunków biologicznych. |
Skocz do: | Dodaj recenzje, komentarz |
- 1. Statystyczna ocena wyników pomiarów
- 1.1. Wprowadzenie. Pojęcie pomiaru (B. Rychlik)
- 1.1.1. Jednostki miar układu SI
- 1.1.1.1. Jednostki podstawowe
- 1.1.1.2. Jednostki pochodne
- 1.1.2. Dziesiętne wielokrotności i podwielokrotności jednostek miar
- 1.1.3. Jednostki miar spoza układu SI
- 1.2. Analiza błędów pomiarowych
- 1.2.1. Rodzaje i źródła błędów pomiarowych
- 1.2.2. Określanie niepewności pomiarowej
- 1.2.2.1. Określanie niepewności pomiarowej wielkości mierzonej bezpośrednio
- 1.2.2.2. Określanie niepewności pomiarowej przy pomiarach pośrednich
- 1.3. Współzależność cech; korelacja i regresja liniowa (B. Rychlik)
- 1.4. Zmienna losowa, rozkłady zmiennej losowej (B. Rychlik)
- 1.5. Kryteria oceny metod analitycznych (M. Puchała)
- 1.6. Ćwiczenia. Rozkłady zmiennych losowych: Gaussa i Poissona (B. Rychlik)
- Literatura
- 2. Ćwiczenia wprowadzające do biofizyki
- 2.1. Gęstość ciał stałych i cieczy (M. Soszyński)
- 2.1.1. Wyznaczanie gęstości ciał stałych i cieczy za pomocą wagi hydrostatycznej
- 2.1.2. Wyznaczanie gęstości względnej cieczy za pomocą piknometru
- 2.1.3. Wyznaczanie gęstości cieczy za pomocą areometru
- 2.1.4. Wyznaczanie gęstości płynów biologicznych metodą pomiaru prędkości opadania kropli
- 2.2. Elementy akustyki i ruch falowy (M. Soszyński)
- 2.2.1. Wyznaczanie prędkości rozchodzenia się dźwięku w ciele stałym za pomocą rury Kundta
- 2.2.2. Wyznaczanie częstości drgań widełek stroikowych metodą Qbuinckego
- 2.3. Wilgotność względna i bezwzględna powietrza (M. Soszyński)
- Zasada działania psychrometru
- 2.4. Kalorymetria (M. Soszyński)
- 2.4.1. Wyznaczanie ciepła topnienia lodu
- 2.4.2. Wyznaczanie współczynnika rozszerzalności objętościowej cieczy za pomocą piknometru
- 2.4.3. Wyznaczanie ilości ciepła wydzielanego z organizmu człowieka przy oddychaniu
- 2.5. Zjawisko termoelektryczne. Wyznaczanie temperatury za pomocą termopary (M. Soszyński)
- 2.6. Pomiar oporu elektrycznego i siły elektromotorycznej (M. Soszyński)
- 2.6.1. Pomiar oporu elektrycznego przewodnika w układzie mostka Wheatstone`a
- 2.6.2. Pomiar siły elektromotorycznej (SEM) ogniwa metodą kompensacji
- 2.7. Oscyloskop katodowy (M. Soszyński)
- 2.8. Warstwa monomolekularna (M. Koter-Michalak)
- Literatura
- 3. Termodynamika
- 3.1. Podstawowe pojęcia termodynamiki klasycznej (M. Bryszewska)
- 3.1.1. Pojęcie układu, parametry układu, stan układu
- 3.1.2. Pierwsza zasada termodynamiki; funkcje stanu
- 3.1.3. Druga zasada termodynamiki; procesy odwracalne i nieodwracalne. Entropia, entalpia swobodna
- 3.1.4. Entalpia swobodna reakcji chemicznych
- 3.1.5. Zadania rachunkowe z termodynamiki (M. Przybylska)
- 3.2. Ćwiczenia
- 3.2.1. Entalpia swobodna reakcji dysocjacji p-nitrofenolu (M. Koter-Michalak)
- 3.2.2. Entalpia swobodna oddziaływania ligandu z błoną komórkową. Wykres Scatcharda (A. Marczak)
- 3.2.3. Wyznaczanie Eo układu oksyhemoglobina/methemoglobina (A. Marczak)
- 3.2.4. Wyznaczanie współczynnika odbicia (A. Marczak)
- 3.2.5. Wyznaczanie mechanicznego współczynnika filtracji (M. Koter-Michalak)
- Literatura
- 4. Spektrofotometria
- 4.1. Podstawy spektroskopii UV-Vis (K Gwoździński, A. Koceva-Chyta)
- 4.1.1. Charakterystyka promieniowania elektromagnetycznego i jego oddziaływania z materią 91
- 4.1.2. Wiązania chemiczne w cząsteczkach
- 4.1.3. Przejścia elektronowe w cząsteczkach
- 4.1.4. Wpływ polarności rozpuszczalnika na widma UV
- 4.1.5. Prawa absorpcji promieniowania elektromagnetycznego i ich zastosowanie
- 4.1.6. Odchylenia od prawa Bouguera-Lamberta-Beera
- 4.1.7. Zastosowanie spektrofotometrii UV-Vis
- 4.2. Budowa i ogólna zasada działania spektrofotometrów UV-Vis (K Gwoździński, A. Koceva-Chyta)
- 4.2.1. Podział spektrofotometrów
- 4.2.2. Parametry charakteryzujące spektrofotometry
- 4.3. Ćwiczenia
- 4.3.1. Prawo Bouguera-Lamberta-Beera. Wyznaczanie współczynników absorpcji (M. Puchała, A. Krokosz)
- 4.3.2. Spektrofotometryczne oznaczanie stężenia związku w mieszaninie dwuskładnikowej. Prawo addytywności absorpcji (M. Puchała, A. Krokosz)
- 4.3.3. Widma absorpcyjne różnych form hemoglobiny. Spektrofotometr dwuwiązkowy w zakresie UV-Vis (M. Puchała, A. Krokosz)
- 4.3.4. Kinetyka reakcji utleniania hemoglobiny. Aktywność katalazy (M. Puchała, A. Krokosz)
- 4.3.5. Wpływ różnych czynników na widma w zakresie UV-Vis (Al Gwoździński)
- Literatura
- 5. Zastosowanie znaczników fluorescencyjnych w badaniach błon biologicznych
- 5.1. Ogólna charakterystyka znaczników fluorescencyjnych (M. Bryszewska)
- 5.1.1. Przykłady najważniejszych znaczników fluorescencyjnych
- 5.1.2. Procesy fizyczne zachodzące w cząsteczce znacznika po pochłonięciu przez nią fotonu
- 5.1.2.1. Absorpcja i fluorescencja
- 5.1.2.2. Polaryzacja fluorescencji
- 5.1.2.3. Gaszenie fluorescencji
- 5.1.3. Aparatura i pomiar fluorescencji znaczników
- 5.2. Badanie fizycznej struktury błon biologicznych za pomocą znaczników fluorescencyjnych (M. Bryszewska)
- 5.2.1. Oddziaływanie znaczników z błonami
- 5.2.2. Lokalizacja znaczników w błonach
- 5.2.3. Badanie ładunku powierzchniowego błon
- 5.2.4. Badanie ruchów cząsteczek w błonach
- 5.2.4.1. Badanie dyfuzji rotacyjnej w błonach
- 5.2.4.2. Badanie dyfuzji lateralnej w błonach
- 5.2.5. Badanie oddziaływań białkowo-lipidowych w błonach
- 5.2.6. Wyniki wybranych badań zmian błon komórkowych w stanach patologicznych przy użyciu znaczników fluorescencyjnych
- 5.3. Ćwiczenia
- 5.3.1. Ogólna budowa i zasada działania spektrofluorymetru (M. Puchała)
- 5.3.2. Charakterystyka spektralna związków fluoryzujących w zakresie UV-Vis (M. Puchała)
- 5.3.3. Fluorymetryczne oznaczanie zawartości tryptofanu w białkach (M. Przybylska, M. Puchała)
- 5.3.4. Analiza dyfuzji lateralnej pirenu w błonach komórkowych krwinek czerwonych (M. Przybylska)
- 5.3.5. Badanie wpływu wybranych związków chemicznych na mikrolepkość błony komórkowej erytrocytów metodą pomiaru współczynnika anizotropii fluorescencji TMA-DPH (M. Przybylska)
- 5.3.6. Oznaczanie potencjału błonowego krwinek czerwonych metodą fluorymetryczną (M. Przybylska)
- 5.3.7. Badanie szybkości transportu doksorubicyny przez błony komórkowe erytrocytów (M. Przybylska)
- 5.3.8. Wyznaczanie parametru wiązania znacznika fluorescencyjnego l-anilinonaftaleno-8-sulfonianu z błoną komórkową krwinek czerwonych (M. Przybylska)
- 5.3.9. Wyznaczanie szybkości akumulacji daunorubicyny w błonach komórkowych fibroblastów metodą transferu energii (M. Przybylska)
- Literatura
- 6. Spektrometria elektronowego rezonansu paramagnetycznego (EPR)
- 6.1. Podstawy spektroskopii EPR (A. Gwoździński, M. Koter-Michalak)
- 6.2. Rodniki nitroksylowe w metodzie znakowania spinowego (K Gwoździński)
- 6.3. Metoda pułapkowania spinowego (K. Gwoździński)
- 6.4. Widma znaczników spinowych przyłączonych do lipidów i białek (K Gwoździński, M. Koter-Michalak)
- 6.5. Budowa spektrometrów EPR (K. Gwoździński)
- 6.6. Ćwiczenia
- 6.6.1. Dobór niektórych parametrów związanych z rejestracją widm EPR (A. Gwoździński)
- 6.6.2. Wyznaczanie podstawowych parametrów widma EPR (Al Gwoździński)
- 6.6.3. Wpływ polarności oraz lepkości rozpuszczalników na widmo EPR (K Gwoździński)
- 6.6.4. Badanie szybkości redukcji związków znakowanych spinowo w erytrocytach (K Gwoździński)
- 6.6.5. Wyznaczanie energii aktywacji procesu redukcji nitroksydu we wnętrzu erytrocytów (Al Gwoździński)
- 6.6.6. Badania zmian konformacyjnych białek błonowych przy użyciu znacznika maleimidowego (K Gwoździński)
- 6.6.7. Denaturacja termiczna znakowanej spinowo albuminy (A. Gwoździński, G. Bartosz)
- 6.6.8. Wyznaczanie parametru widmowego Tempo dla sztucznych błon fosfolipidowych (M. Koter-Michalak)
- 6.6.9. Badanie wpływu etanolu na stopień uporządkowania lipidów błony erytrocytarnej (M. Koter-Michalak)
- 6.6.10. Wyznaczanie mikrolepkości wnętrza erytrocytu (M. Koter-Michalak)
- 6.6.11. Badanie wolnych rodników w materiale biologicznym (M. Koter-Michalak)
- Literatura
- 7. Inne metody spektroskopowe
- 7.1. Turbidymetria i nefelometria (A. Koceva-Chyła)
- 7.1.1. Podstawy teoretyczne
- 7.1.2. Ćwiczenia
- 7.1.2.1. Turbidymetryczne oznaczenie stężenia komórek (A. Koceva-Chyła)
- 7.1.2.2. Wyznaczanie przebiegu hemolizy krwinek na podstawie pomiaru zmian turbidancji (A. Koceva-Chyła)
- 7.2. Polarymetria (A. Koceva-Chyła, M. Puchała)
- 7.2.1. Podstawy teoretyczne
- 7.2.1.1. Światło niespolaryzowane
- 7.2.1.2. Polaryzacja światła, światło spolaryzowane
- 7.2.1.3. Sposoby polaryzacji światła
- 7.2.1.4. Polaryzatory i analizatory światła
- 7.2.1.5. Skręcenie płaszczyzny polaryzacji przez substancje optycznie czynne
- 7.2.1.6. Dichroizm kołowy (M. Puchała, A. Krokosz)
- 7.2.1.7. Dyspersja skręcalności optycznej i dichroizm kołowy (At. Puchała, A. Krokosz)
- 7.2.1.8. Skręcalność właściwa
- 7.2.1.9. Oznaczanie kąta skręcenia płaszczyzny polaryzacji
- 7.2.1.10. Polarymetry — rodzaje i budowa
- 7.2.1.11. Zasada pomiaru kąta skręcenia płaszczyzny polaryzacji w polarymetrze kołowym
- 7.2.2. Budowa i zasada działania polarymetru automatycznego POLAMAT A (A. Krokosz)
- 7.2.3. Ćwiczenia
- 7.2.3.1. Polarymetryczne oznaczenie stężenia i skręcalności właściwej sacharozy (A. Koceva-Chyła)
- 7.2.3.2. Aktywność optyczna aminokwasów i białek (M. Puchała, A. Krokosz)
- 7.3. Refraktometria (A. Koceva-Chyła)
- 7.3.1. Podstawy teoretyczne
- 7.3.1.1. Zjawiska odbicia i załamania światła w ośrodkach izotropowych
- 7.3.1.2. Zjawisko całkowitego wewnętrznego odbicia, kąt graniczny
- 7.3.1.3. Czynniki wpływające na wartość współczynnika załamania światła
- 7.3.1.4. Refrakcja molowa, refrakcja właściwa i egzaltacja
- 7.3.1.5. Zastosowanie pomiaru kąta granicznego w refraktometrii
- 7.3.1.6. Refraktometry — budowa i zasada działania
- 7.3.2. Ćwiczenia
- 7.3.2.1. Wyznaczenie zależności pomiędzy stężeniem a współczynnikiem załamania światła roztworów alkoholu etylowego i alkoholu metylowego (A. Koceva-Chyta)
- 7.3.2.2. Wyznaczenie stężenia białka w osoczu krwi metodą refraktometryczną (A. Koceva-Chyła)
- Literatura
- 8. Potencjometria i konduktometria
- 8.1. Potencjometria (A. Fortuniak)
- 8.1.1. Elektrody
- 8.1.1.1. Elektroda wodorowa
- 8.1.1.2. Elektrody pierwszego rodzaju
- 8.1.1.3. Elektrody drugiego rodzaju
- 8.1.1.4. Elektrody trzeciego rodzaju
- 8.1.1.5. Elektrody redoks
- 8.1.1.6. Elektrody tlenkowe
- 8.1.1.7. Elektrody jonoselektywne
- 8.1.1.7.1. Elektrody membranowe krystaliczne
- 8.1.1.7.2. Elektrody membranowe heterogenne
- 8.1.1.7.3. Elektrody membranowe z ciekłym wymieniaczem
- 8.1.1.7.4. Elektrody enzymatyczne
- 8.1.2. Zastosowanie pomiarów potencjometrycznych
- 8.1.2.1. Pomiar pH
- 8.1.2.2. Miareczkowanie potencjometryczne
- 8.1.2.2.1. Miareczkowanie metodą klasyczną
- 8.1.2.2.2. Miareczkowanie do punktu zerowego
- 8.1.2.2.3. Miareczkowanie metodą różnicową
- 8.1.2.2.4. Miareczkowanie z dwumetalicznym układem elektrod
- 8.1.3. Zastosowanie pomiarów potencjometrycznych do wyznaczania stałych fizykochemicznych
- 8.2. Konduktometria (A. Fortuniak)
- 8.2.1. Zastosowanie pomiarów konduktometrycznych
- 8.2.1.1. Miareczkowanie konduktometryczne
- 8.2.1.2. Miareczkowanie alkacymetryczne
- 8.2.1.3. Miareczkowanie strąceniowe
- 8.2.2. Konduktometria bezpośrednia
- 8.2.3. Zastosowanie pomiarów konduktometrycznych
- 8.2.3.1. Wyznaczanie stałej dysocjacji
- 8.2.3.2. Wyznaczanie iloczynu rozpuszczalności
- 8.3. Ćwiczenia
- 8.3.1. Jonowe właściwości aminokwasów pH-metryczne wyznaczanie pA glicyny (A. Marczak) 266
- 8.3.2. Miareczkowanie kwasu ortofosforowego pH-metrycznie i wobec wskaźników pH (A. Marczak)
- 8.3.2.1. Miareczkowanie wobec wskaźników
- 8.3.2.2. Miareczkowanie pH-metryczne
- 8.3.3. Wyznaczanie przewodności elektrycznej erytroplazmy (M. Koter-Michalak)
- Literatura
- 9. Wiskozymetria
- 9.1. Lepkość biopolimerów (K Gwoździński)
- 9.1.1. Lepkość, wiadomości ogólne
- 9.1.2. Makrocząsteczka podczas przepływu
- 9.1.3. Pomiary lepkości
- 9.2. Ćwiczenia
- 9.2.1. Wyznaczanie współczynnika lepkości metodą Stokesa (M. Soszyński)
- 9.2.2. Pomiar lepkości względnej cieczy przy użyciu wiskozymetru kapilarnego (M. Soszyński) 284
- 9.2.3. Zastosowanie pomiarów lepkości do wyznaczania masy cząsteczkowej polimeru (Al Gwoździński)
- Literatura
- 10. Wirowanie
- 10.1. Wirówki (M. Puchała)
- 10.2. Ultrawirówki (Al Gwoździński)
- 10.3. Określanie mas cząsteczkowych metodą szybkości sedymentacji (A. Gwoździński)
- 10.4. Wyznaczanie mas cząsteczkowych metodą równowagi sedymentacyjnej (A. Gwoździński)
- 10.5. Sedymentacja w gradiencie gęstości (Al Gwoździński)
- 10.6. Równowaga sedymentacyjna w ustalonym gradiencie (Al Gwoździński)
- 10.7. Ćwiczenia
- 10.7.1. Wirowanie — ćwiczenie wstępne (A. Krokosz)
- 10.7.2. Termiczna denaturacja białka (M. Puchała)
- 10.7.3. Rozdział lipoprotein osocza metodą ultrawirowania (A. Gwoździński)
- 10.7.4. Rozdział mieszaniny kwasów rybonukleinowych metodą wirowania w gradiencie gęstości sacharozy (A. Gwoździński)
- 10.7.5. Oznaczanie pojedynczych pęknięć w DNA metodą ultrawirowania w gradiencie sacharozy alkalicznej (B. Rózga)
- 10.7.6. Oznaczanie superhelikalności nukleoidu DNA metodą ultrawirowania w gradiencie sacharozy neutralnej (B. Rózga)
- Literatura
- 11. Elektroforeza
- 11.1. Ogólne zasady (G. Załeśna)
- 11.1.1. Próbka
- 11.1.2. Bufory
- 11.1.3. Elektroendoosmoza
- 11.1.4. Zastosowanie metody
- 11.2. Ćwiczenia
- 11.2.1. Rozdział białek surowicy krwi człowieka na acetylocelulozie (W. Duda, G. Zaleśna)
- 11.2.2. Rozdział białek surowicy ludzkiej metodą elektroforezy w żelu poliakryloamidowym (G. Zaleśna)
- 11.2.3. Oznaczanie masy cząsteczkowej białek metodą elektroforezy w żelu poliakryloamidowym z SDS (wg Weber i Osborn, 1969) (G. Zaleśna)
- 11.2.4. Oznaczanie punktu izoelektrycznego białek metodą ogniskowania izoelektrycznego (G. Zaleśna)
- Literatura
- 12. Chromatografia
- 12.1. Podstawy teoretyczne, zastosowanie metody (K Gwoździński)
- 12.1.1. Chromatografia adsorpcyjna (K Gwoździński)
- 12.1.1.1. Izotermy adsorpcji
- 12.1.1.2. Czynniki wpływające na rozdział chromatograficzny
- 12.1.1.3. Monitorowanie rozdziału w chromatografii kolumnowej
- 12.1.2. Chromatografia podziałowa (A. Gwoździński)
- 12.1.3. Chromatografia bibułowa (A. Gwoździński)
- 12.1.3.1. Identyfikacja chromatogramów
- 12.1.3.2. Zależność między współczynnikiem Rf a budową substancji
- 12.1.4. Chromatografia cienkowarstwowa (AL Gwoździński)
- 12.1.5. Filtracja żelowa (A. Gwoździński)
- 12.1.5.1. Złoża stosowane w chromatografii żelowej
- 12.1.5.2. Współczynniki podziału w chromatografii żelowej
- 12.1.5.3. Charakterystyka pasm i parametry kolumny chromatograficznej
- 12.1.5.4. Oznaczanie mas cząsteczkowych metodą chromatografii żelowej
- 12.1.6. Chromatografia jonowymienna (K Gwoździński)
- 12.1.6.1. Rodzaje wymieniaczy jonowych
- 12.1.6.2. Parametry charakteryzujące wymieniacze jonowe
- 12.1.6.3. Bufory stosowane w chromatografii jonowymiennej
- 12.1.6.4. Zastosowania chromatografii jonowymiennej
- 12.1.7. Wysokosprawna chromatografia cieczowa (A. Gwoździński)
- 12.1.8. Chromatografia gazowa
- 12.2. Ćwiczenia
- 12.2.1. Zastosowanie metody filtracji żelowej do oznaczania masy cząsteczkowej białka (K. Gwoździński)
- 12.2.2. Oznaczanie stężenia adduktu MDA-TBA metodą wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej HPLC (A. Gwoździński)
- 12.2.3. Rozdział barwników roślinnych za pomocą kolumnowej chromatografii adsorpcyjnej (A. Gwoździński)
- 12.2.4. Rozdział substancji z wykorzystaniem chromatografii cienkowarstwowej (A. Gwoździński)
- Literatura
- 13. Biofizyka białek
- 13.1. Ogólne informacje o białkach (Z. Szweda-Lewandowska)
- 13.2. Właściwości funkcjonalne i fizykochemiczne hemoglobiny
- 13.3. Ćwiczenia
- 13.3.1. Otrzymywanie i oznaczanie stężenia hemoglobiny (Z. Szweda-Lewandowska)
- 13.3.2. Oznaczanie krzywej dysocjacji tlenowej hemoglobiny metodą spektrofotometryczną (Z. Szweda-Lewandowska)
- 13.3.3. Efekt Bohra (Z. Szweda-Lewandowska)
- 13.3.4. Oznaczenie granicznej liczby lepkościowej [r/] roztworów hemoglobiny natywnej i zdenaturowanej (Z. Szweda-Lewandowska)
- 13.3.5. Badanie stabilności methemoglobiny (Z. Szweda-Lewandowska)
- 13.3.5.1. Otrzymywanie methemoglobiny (Z. Szweda-Lewandowska)
- 13.3.5.2. Oznaczanie stabilności MetHb w środowisku kwaśnym oraz w obecności mocznika i chlorowodorku guanidyny (Z. Szweda-Lewandowska)
- 13.3.5.3. Oznaczenie szybkości denaturacji MetHb w moczniku i chlorowodorku guanidyny (Z. Szweda-Lewandowska)
- 13.3.5.4. Wyznaczanie energii aktywacji dla procesu denaturacji MetHb w środowisku kwaśnym (Z. Szweda-Lewandowska)
- 13.3.5.5. Wyznaczanie pA methemoglobiny (D. Patecz)
- 13.4. Charakterystyka dysmutazy ponadtlenkowej (G. Zaleśna)
- 13.4.1. Izolowanie dysmutazy ponadtlenkowej z wątroby wieprzowej
- 13.4.2. Charakterystyka białka enzymatycznego
- 13.4.2.1. Oznaczanie białka
- 13.4.2.2. Metoda barwienia żeli na aktywność dysmutazy ponadtlenkowej
- 13.4.2.3. Metoda pirogallolowa oznaczania aktywności dysmutazy ponadtlenkowej
- Literatura
- 14. Biofizyka Mon
- 14.1. Błony biologiczne (M. Bryszewska)
- 14.1.1. Skład lipidowy błon
- 14.1.2. Asymetria lipidów błonowych
- 14.1.3. Oddziaływania międzycząsteczkowe
- 14.1.4. Płynność błony
- 14.1.5. Ruchy cząsteczkowe w dwuwarstwie lipidowej
- 14.1.6. Białka błonowe
- 14.1.7. Transport przez błony
- 14.2. Ćwiczenia
- 14.2.1. Wyznaczanie współczynnika przenikania (D. Patecz)
- 14.2.2. Oporność osmotyczna erytrocytów (D. Patecz)
- 14.2.3. Energia aktywacji procesu hemolizy (D. Patecz)
- 14.2.3.1. Turbidymetryczny pomiar energii aktywacji procesu hemolizy
- 14.2.3.2. Absorpcjometryczny pomiar energii aktywacji procesu hemolizy
- 14.2.4. Izolowanie błon erytrocytarnych i charakterystyka chemiczna otrzymanego preparatu (A. Marczak)
- 14.2.4.1. Izolowanie błon erytrocytarnych
- 14.2.4.2. Ekstrakcja lipidów z błon erytrocytarnych (Vaskovsky i wsp., 1975)
- 14.2.4.3. Charakterystyka chemiczna otrzymanych błon erytrocytarnych
- 14.2.4.3.1. Oznaczanie zawartości białka
- 14.2.4.3.2. Oznaczenie zawartości hemoglobiny
- 14.2.4.3.3. Identyfikacja i oznaczanie ilościowe fosfolipidów błon erytrocytarnych
- 14.2.4.3.4. Oznaczanie zawartości cholesterolu
- 14.2.4.4. Opracowanie wyników
- 14.2.5. Otrzymywanie liposomów z lecytyny jaja kurzego i badanie ich przepuszczalności dla chromianu (D. Patecz)
- 14.2.6. Wyznaczanie szybkości transportu 2,4-dinitrofenyloglutationu z erytrocytów człowieka (M. Soszyński)
- Literatura
- 15. Wolne rodniki, antyutleniacze oraz uszkodzenia lipidów, białek i kwasów nukleinowych
- 15.1. Powstawanie wolnych rodników (M. Gwoździński)
- 15.2. Reakcje wolnych rodników (M. Gwoździński)
- 15.3. Wolne rodniki w biologii i medycynie (M. Gwoździński)
- 15.3.1. Powstawanie wolnych rodników in vivo
- 15.3.2. Udział czynników zewnętrznych w generowaniu aktywnych form tlenu
- 15.4. Komórkowe i tkankowe systemy ochronne przeciw aktywnym formom tlenu (M. Gwoździński)
- 15.5. Wolne rodniki w patologii (M. Gwoździński)
- 15.5.1. Utlenianie i modyfikacja lipidów
- 15.5.2. Utlenianie i modyfikacja białek
- 15.5.3. Utlenianie kwasów nukleinowych
- 15.6. Ćwiczenia
- 15.6.1. Oznaczanie stężenia zredukowanego glutationu w erytrocytach poddanych działaniu H2O2 (A. Marczak, K. Rękawiecka)
- 15.6.2. Oznaczanie rodników hydroksylowych HO` w układach biologicznych (Z. Szweda-Lewandowska)
- 15.6.2.1. Analiza degradacji deoksyrybozy przez układy generujące rodniki HO*
- 15.6.2.2. Oznaczanie stałych szybkości reakcji rodników HO`
- 15.6.3. Oznaczanie całkowitej zdolności antyoksydacyjnej płynów biogennych (G. Batrosz)
- 15.6.3.1. Oznaczanie całkowitej zdolności antyoksydacyjnej na zasadzie hamowania utleniania ABTS
- 15.6.3.2. Oznaczanie całkowitej zdolności antyoksydacyjnej na zasadzie hamowania utleniania 2`,7`-dichlorofluorescyny
- 15.6.3.3. Oznaczanie całkowitej zdolności antyoksydacyjnej na zasadzie redukcji jonów żelazowych
- 15.6.3.4. Oznaczanie całkowitej zdolności antyoksydacyjnej na zasadzie redukcji kationorodnika ABTS,+
- 15.6.4. Pułapkowanie spinowe (K. Gwoździński)
- 15.6.4.1. Pułapkowanie rodnika HO` przy użyciu DMPO
- 15.6.4.2. Pułapkowanie rodnika 02~` przy użyciu DMPO
- 15.6.4.3. Pułapkowanie rodników 02 ` i HO` w pobudzonych neutrofilach
- 15.6.4.4. Pułapkowanie rodnika HO` przy użyciu PBN
- Literatura
- 16. Metody stosowane w badaniach apoptozy w komórkach (Z. Jóźwiak)
- 16.1. Apoptoza — wprowadzenie
- 16.1.1. Rola białka p53
- 16.1.2. Rodzina białek Bcl-2
- 16.1.3. Struktura i funkcja kaspaz
- 16.1.4. Mechanizmy indukcji apoptozy
- 16.2. Ćwiczenia
- 16.2.1. Oznaczanie zmian apoptotycznych w komórkach za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego
- 16.2.2. Oznaczanie potencjału błony mitochondrialnej
- 16.2.3. Oznaczanie reaktywnych form tlenu w hodowlach komórkowych
- 16.2.4. Oznaczanie wewnątrzkomórkowego stężenia wapnia w fibroblastach
- 16.2.5. Oznaczanie aktywności kaspazy 3 w komórkach apoptotycznych
- 16.2.6. Oznaczanie uszkodzeń DNA metodą kometową
- 16.2.7. Oznaczanie fragmentacji DNA w żelu agarozowym
- Literatura
- 17. Cytometria przepływowa (/. Skierski)
- 17.1. Wprowadzenie
- 17.2. Ćwiczenia
- 17.2.1. Utrwalanie komórek w alkoholu etylowym
- 17.2.2. Oznaczanie zawartości kwasów nukleinowych DNA i RNA przy użyciu barwienia oranżem akrydyny
- 17.2.3. Oznaczanie indeksu mitotycznego przy użyciu metody kwaśnej denaturacji DNA i barwienia oranżem akrydyny
- 17.2.4. Oznaczanie odsetka komórek żywych i martwych przy użyciu dioctanu fluoresceiny i jodku propidyny
- 17.2.5. Oznaczanie odsetka komórek apoptotycznych przy użyciu barwienia aneksyną V i jodkiem propidyny
- 17.2.6. Oznaczanie zawartości DNA i białek cytoplazmatycznych w komórkach po zabarwieniu DAPI i sulforodaminą
- 17.2.7. Wyznaczanie odsetka subpopulacji limfocytów przy użyciu zestawu przeciwciał monoklonalnych simultest firmy Becton-Dickinson
- Literatura
- 18. Zastosowanie laserów w biologii i medycynie
- 18.1. Generowanie promieniowania laserowego (/ Kujawa)
- 18.2. Oddziaływanie promieniowania laserowego z tkanką biologiczną (/. Kujawa)
- 18.3. Ćwiczenia
- 18.3.1. Określanie stopnia hemolizy krwinek czerwonych poddawanych naświetlaniu promieniowaniem laserowym po inkubacji z ftalocyjaninami (E. Krajewska, D. Patecz)
- 18.3.2. Pomiar aktywności acetylocholinoesterazy erytrocytarnej poddanej działaniu promieniowania
Zobacz spis treści
Sprawdź dostępność, zarezerwuj (zamów):
(kliknij w nazwę placówki - więcej informacji)